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液相色谱柱的灵敏度不够时,我们该如何去解决呢?

点击次数:292次 发布时间:2020-02-10

      液相色谱柱的结构组成:
  a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。
  柱接头采用低死体积结构,柱接头是两端螺纹组件,一端是为7/16英寸外螺纹,另一端是3/16英寸的内螺纹(国内外已规范化)。7/16英寸外螺纹与1/4英寸柱管(Φ6.35mm)连接,中间放置压环用于密封。3/16英寸的内螺纹与1/16英寸(Φ1.57mm)的连接管连接,中间也放置压环用于柱接头的密封。为了尽量减少柱外死体积,在安装色谱柱时,用Φ1.57mm连接管通过空心螺钉压环后要尽量插到底,然后再拧紧空心螺钉。压环被空心螺钉挤压变形后紧箍在连接管上(连接管通过压环后露出的管长度应严格控制在2.5mm长或其他固定尺寸)。
  在两端柱接头内,柱管两端各放置一片不锈钢滤片(或滤网),用于封堵柱填料不被流动相冲出柱外而流失。空柱各组件均为316#不锈钢材质,能耐受一般的溶剂作用。但由于含氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性,故使用时要注意,柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂,以避免腐蚀。
  b、柱填料:液相色谱柱的分离作用是在填料与流动相之间进行的,柱子的分类是依据填料类型而定。
  正相柱:多以硅胶为柱填料。根据外型可分为无定型和球型两种,其颗粒直径在3—10 ?m的范围内。另一类正相填料是硅胶表面键合—CN,-NH2等官能团即所谓的键合相硅胶。
  反相柱:主要是以硅胶为基质,在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。
  常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等,其颗粒粒径在3—10 ?m之间。
  液相色谱仪色谱柱灵敏度不够时如何解决:
  液相色谱仪是实验中zui常见的仪器之一,色谱柱的灵敏度是确保实验准确性的重要原因,那么当色谱柱的灵敏度不够时,我们该如何去解决呢?应该从以下几个方面去分析:
  1、样品量不足:解决办法为增加样品量
  2、样品未从柱子中流出:可根据样品的化学性质改变流动相或柱子
  3、样品与检测器不匹配:根据样品化学性质调整波长或改换检测器
  4、检测器衰减太多:调整衰减即可。
  5、检测器时间常数太大:解决办法为降低时间参数
  6、检测器池窗污染:解决办法为清洗池窗。
  7、检测池中有气泡:解决办法为排气。
  8、记录仪测压范围不当:调整电压范围即可。
  9、流动相流量不合适:调整流速即可。
  10、检测器与记录仪超出校正曲线:解决办法为检查记录仪与检测器,重作校正曲线。
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